advertisement

Tema 4t c3_la1

33 %
67 %
advertisement
Information about Tema 4t c3_la1
Technology

Published on March 12, 2014

Author: hioidex

Source: slideshare.net

advertisement

Tema IV Tipus de mesura: Punt final, Dos punts i Cinètica

Continguts  Descripció del procés de mesura de punt final. Concepte d’incubació  Descripció del procés de mesura de dos punts  Mesures cinètiques: proves enzimàtiques; activitat enzimàtica i les seves unitats; complex enzim-substrat  El test òptic  Determinacions enzimàtiques. Concepte de copulació  Càlcul de la [ ] mitjançant un estàndard i mitjançant el coeficient d’absorció molar (ε )

Objectius específics  Deduir la llei de Lambert-Beer aplicada a mesures de punt final, dos punts i cinètiques  Seleccionar el tipus de mesura en funció del paràmetre a determinar, identificant els valors de referència a utilitzar  Calcular la [ ] d’un anàlit en funció dels paràmetres coneguts d’un estàndard per a mesures de punt final i dos punts  Identificar les diferències entre mesures cinètiques per a determinar metabòlits i per a determinar activitats enzimàtiques  Calcular l’activitat enzimàtica en mesures cinètiques, mitjançant la utilització d’estàndards i mitjançant registres gràfics

Introducció  ≠ cases comercials ≠ reactius  reactius/ mostres/ proporcions adients  mostra-reactiu → canvi apreciable i mesurable per l’espectrofotòmetre  presència, absència, quantitat, concentració i/o activitat dels anàlits  determinacions LAB: punt final, dos punts i cinètiques

Punt final Mostra biològica (anàlit)... Reactius i mètode... Temps d’incubació o del producte final de la reacció (substrat→producte) Absorbància del producte a determinada λ Càlcul [ ] Cx = Cp · (Ax/Ap) Estabilitat de la reacció i linealitat Unitats clàssiques // Unitats S.I // F. Conv

Dos punts • Mesurem dos valors d’absorbància en dos moments diferents del temps de reacció • t1 → A1 o Ainicial • t2 → A2 o Afinal • Tant de l’estàndard com de la mostra • Càlcul [ ] Cx = Cpatró • [ (A2 – A1) pacient / (A2 – A1) patró ]

Mesures cinètiques • Mesurem la velocitat de la reacció abans que finalitzi • És molt important mantenir les condicions de la reacció descrites en els protocols comercials sobre temperatura, temps de mesura, etc., per a garantir la fiabilitat dels resultats • En aquestes determinacions, l’absorbància no és directament proporcional a la concentració del paràmetre biològic en la mostra problema • És la variació de l’absorbància durant una unitat de temps establerta, la que és proporcional a la concentració i/o activitat del paràmetre • La presència del paràmetre en la mostra donarà lloc a la aparició o desaparició de substàncies que absorbirien la radiació a la λ de la mesura

• La llei de Lambert-Beer queda modificada o adaptada: ∆A = ε l c ∆A = ∆E = ∆DO ; variació de la densitat òptica.. • Generalment agafem el minut com a unitat de temps de mesura de la ∆DO i per tant: ∆DO/minut = ε l c c = ∆DO/minut • F

• A major concentració del paràmetre biològic, major serà la variació d’absorbància en la unitat de temps ↑[ analit] → ↑ ∆DO/minut • En el cas de què el paràmetre sigui un enzim, i determinem l’activitat enzimàtica, aleshores, la variació d’absorbància en la unitat de temps serà directament proporcional a la seva activitat.

Tipus de mesures cinètiques • Proves enzimàtiques • Determinacions de metabòlits per enzims

Proves enzimàtiques(I) • L’analit és un enzim del nostre organisme • Determinen la seva activitat • Bona correlació entre la [enzim] i la situació orgànica del pacient E + S ⇔ ES ⇒ E + P • La velocitat de la reacció depèn de: • Temps de formació del complex amb el substrat • Temps de formació del producte de la reacció

Proves enzimàtiques(II) • Activitat enzimàtica • Quantitat de substrat transformat per unitat de temps • Unitats d’activitat : • Unitat estàndard (UI)—quantitat d’enzim per a catalitzar un micromol de substrat per minut • Katal (kat)—mesura la quantitat de catalitzador que causa la reacció de 1 mol de reactiu en 1 segon • Equivalència: 1 kat = 60000 UI 1 µkat = 60 UI

Càlcul a partir del coeficient d’absorció molar (ε) • Coneixem el valor de l’ε del substrat o del producte, a una determinada λ, no ens caldrà l’estàndard • Calcularem l’increment d’extinció en un increment de temps • Fórmula: Activitat = (∆Ax/εl)•(Vt/Vp)•(1/∆t)•1000 • El cocient (∆A/∆t) • (IA=1 / ν)= tg α • IA=1 = cms paper registrador, per un ↑d’absorbància d’una unitat ν = velocitat del paper registrador, en cm/segon • Ex: tg α = 0,5 ------------------ α = arctg 0,5 ; tg-1 0,5 ; tan-1 0,5 Calculadora: 0.5 ↵ INV ↵tg-1

Aplicacions Quimioluminescència TSH T4 T3 T4 lliure Ferritina β2 Microglobulina Prolactina LH FSH Teofil·lina Digoxina Marcadors Tumorals (CEA, PSA, PSA lliure, CA125, CA19.9….) Fàrmacs (Antibiòtics, Antitumorals, Antiepilèptics…) Drogues….

Add a comment

Related presentations

Presentación que realice en el Evento Nacional de Gobierno Abierto, realizado los ...

In this presentation we will describe our experience developing with a highly dyna...

Presentation to the LITA Forum 7th November 2014 Albuquerque, NM

Un recorrido por los cambios que nos generará el wearabletech en el futuro

Um paralelo entre as novidades & mercado em Wearable Computing e Tecnologias Assis...

Microsoft finally joins the smartwatch and fitness tracker game by introducing the...

Related pages

Bild: 4t, 687 , 90zt, 4325 von absurd-real bei KunstNet

Thema erstellen; Anmelden; 4t, 687, 90zt, 4325. Von absurd-real hochgeladen am 11.08.2016. Titel: Tags: 4t; 687 ; 90zt; wt; 4325;
Read more

Castrol Power 1 Preisvergleich - billiger.de

Castrol Power 1 Racing 4T 10W-40 - Nachfolger des Castrol Power 1 Off Road 4T 10W-40 Merkmale: ... Themen/Thema/Castrol-Power-1/index/s_name/noFilter ...
Read more

Classe de 4t de Primària » PUNTS BÀSICS

Tema 5 Medi Social 4t Tema 5 Medi Social 4t Tema 5 Medi Natural 4t Tema 5 Medi Natural 4t. QUADERN D’OPERACIONS _____ PART 1 – OPERACIONS (WORD) ...
Read more

Motul 5100 4T Preisvergleich - billiger.de

Motul 5100 4T im Bereich Sonstiges Motorradzubehör: 35 Angebote/Produkte ab 9,00 EUR (Stand 08.08.2016) bei billiger.de - Preisvergleich, Produkt- und ...
Read more

Vespaforum.de... das Vespa Forum GT GTS LX S ET PX • Thema ...

Vorheriges Thema | Nächstes Thema : Autor Nachricht; schoenauer-r Betreff des Beitrags: LX 50, 2-Takt oder 4-Takt? ... (wie lange hält eine LX 50 4T 4V, ...
Read more

Alles zum Thema Elektrizit%C3%A4t | auf Helles-Koepfchen.de

Thema: Das große Helles Köpfchen-Abkürzungsverzeichnis - Posting von *Mandy* Thema: Findet ihr es OK wenn man Schwul ist? - Posting von Sanny12334455666;
Read more

Zitat zum Thema: Pubertät aus der Zeit: 19. Jahrhundert ...

Thema eingeben (z.B. "Liebe") [ Hilfe? hier klicken! ] Rubrik. Aphorismen; Themen. Pubertät; Autoren. Johann Christoph Friedrich von Schiller; Zeitraum.
Read more

Zitat zum Thema: Solidarität von: Oswald von Nell-Breuning ...

Thema eingeben (z.B. "Liebe") [ Hilfe? hier klicken! ] Rubrik. Aphorismen; Themen. Solidarität; Autoren. Oswald von Nell-Breuning; Zeitraum. 20.
Read more

Google

Noch mehr » Account Options. Anmelden; Sucheinstellungen
Read more