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Published on December 28, 2007

Author: Me_I

Source: authorstream.com

Slide1:  Comportamento Suicida em Bipolares Mikelle Alexandra Ferreira Orientador: Prof.Humberto Correa Laboratório de Farmacologia e Biologia Molecular Instituto de Ciências Biológicas Suicídio:  Suicídio O suicídio é um assunto de saúde pública Figura entre as 10 principais causas de mortes e representa 1,8% de todas as mortes, sendo a segunda ou terceira causa de morte entre jovens de 15 - 25 anos. Estima-se que em 2020, 1,5 milhão de mortes ocorrerão por suicídio (2,4% de todas as mortes). As tentativas de suicídio são 10 - 20 vezes mais frequentes do que os suicídio completos e é o principal preditor de futuras tentativas e suicídio completo. As tentativas graves e o suicídio completo ocorrem em quase 100% dos casos em pessoas com doença psiquiátrica. Suicídio e disfunção serotoninérgica:  Suicídio e disfunção serotoninérgica O sistema serotoninérgico é complexo e envolve enzimas, transportadores e receptores. Vários estudos mostraram que suicídio estava intimamente relacionado com baixa função serotoninérgica (Asberg e cols., 1976) Suicídio e disfunção serotoninérgica:  Suicídio e disfunção serotoninérgica Para o gene da triptofano hidroxilase os polimorfismos a serem estudados são duas variações no íntron 7 (A218C e A779C). Para a proteína do receptor 5-HT2A o polimorfismo mais estudado é uma mutação silenciosa no aminoácido 102 (T102C). Na proteína do receptor 5-HT2C estuda-se um polimorfismo que consiste de uma substituição Cys23-Ser23 na primeira região hidrofóbica. Para a proteína do receptor 5-HT1A estuda-se uma substituição de glicina por serina no aminoácido 22 e de uma isoleucina por valina no aminoácido 28 (Nakhai e col., 1995). Suicídio e disfunção serotoninérgica :  Suicídio e disfunção serotoninérgica Para o gene da enzima MAO-A estuda-se um polimorfismo que consiste de uma repetição variável na região promotora da MAO-A, com possíveis diferenças funcionais entre os alelos (Sabol e col., 1998) Para o gene do transportador de serotonina estuda-se um polimorfismo na região promotora, próximo ao início da transcrição com duas variantes alélicas, uma longa e uma curta. Localizado no cromosomo 17q11.1-q12 (Ramamoorthy ecols.,1993) Possível papel funcional deste polimorfismo em que o alelo curto recaptaria menos serotonina do que o longo (Lesh e col., 1996, Du e col., 1999) Slide6:  Suicídio e disfunção serotoninérgica Suicídio e disfunção serotoninérgica:  Suicídio e disfunção serotoninérgica Gens relacionados à função serotoninérgica são candidatos naturais ao estudo do suicídio Variações na expressão do fenótipo Variações funcionais secundárias a variações genéticas Transtorno Bipolar e Suicídio:  Transtorno Bipolar e Suicídio O Transtorno Tipos Fases Principais teorias etiológicas Dentre todos os pacientes psiquiátricos é o grupo que apresenta as maiores taxas de suicídio e que utiliza métodos mais letais (Baldessarini e Tondo, 2003) 20% da mortalidade neste grupo é devida ao suicídio e 25-50% fazem pelo menos 1 tentativa ao longo da vida (Goodwin e Jamoson, 1990) Terceira principal causa de morte entre bipolares (Sharma e cols.,1994), porém a que apresenta maior risco relativo. Comorbidades são bastante comuns Transtorno Bipolar e Suicídio:  Transtorno Bipolar e Suicídio Transtorno Bipolar e Suicídio:  Transtorno Bipolar e Suicídio Fatores de risco: História familiar de suicídio Sexo masculino História de abuso sexual infantil Abuso de substância Maior ocorrência de episódios mistos e depressivos Maior grau de impulsividade Diagnóstico de transtorno bipolar II ( comorbidades psiquiátricas e abuso de drogas/dificuldade no diagnóstico) Dependência de drogas ou álcool é 7,9 vezes mais freqüente em bipolares do que na população em geral Ainda se faz necessário mais estudos Objetivos do Trabalho:  Objetivos do Trabalho Avaliar entre os pacientes admitidos com diagnóstico de Transtorno bipolar (DSM-IV ) para tratamento psiquiátrico no Hospital Governador Israel Pinheiro a freqüência de história de tentativa de suicídio, assim como suau características como letalidade, gravidade e tipo. Investigar nos pacientes com história de tentativa de suicídio cuja letalidade tenha sido igual ou superior a 3 a freqüência dos alelos dos genes relacionados ao sistema serotoninérgico. Comparar a freqüência dos polimorfismos estudados entre os pacientes citados com a freqüência desses mesmos alelos em um grupo controle. Correlacionar os polimorfismos dos genes em estudo com sintomas psicopatológicos e traços de personalidade obtidos através de escalas e questionários específicos. Quantificar a magnitude e importância relativa decada componente biológico, social e psicológico em relação ao comportamento suicida. Materiais e Métodos:  Materiais e Métodos DNA genômico extraído a partir do sangue periférico dos pacientes (5 mL para cada participante), coletado através do sistema à vácuo em tubos heparinizados. Extração feita pela sílica ou pelo Kit. Após a extração é feita a reação em cadeia da polimerase (PCR). Então é feita eletroforese em gel de poliacrilamida Revelação do gel em solução de prata Protocolos: Slide13:  Materiais e métodos PCR- 1 tubo Slide14:  Materiais e Métodos Programa do termociclador: Slide15:  Materiais e Métodos Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE) → 1,5 L do padrão de peso molecular de 100 pb (12 L de 100 pb DNA Ladder – Invitrogen; 58 L de Tampão de Amostra e 130 L de H2O destilada) → 5 L do produto da PCR + 1 L de Gel Loading Buffer (0,255% Azul de Bromofenol; 0,25% Xileno Cianol; 30% Glicerol) → Gel de poliacrilamida (6,5%): a partir de uma solução de acrilamida 30% (10 g bis-acrilamida, 20 g acrilamida, 1000 ml H2O qsp), TBE 10x (60,50 g Tris Base; 30,85 g Ácido Bórico; 3,72 g EDTA dissódico bihidratado; 1000 mL H2O qsp) e H2O destilada. Polimerização realizada com APS (10 g Perssulfato de Amônio; 100 mL H2O qsp) e TEMED (BioRad) Slide16:  Materiais e Métodos Slide17:  Materiais e Métodos → Placas submetidas a 90 mV e tamponadas em TBE 1x (10 mL TBE 10x; 1000 mL H2O qsp) → Coloração pela prata: - Fixação em ácido acético 10% (10 min) - Lavagem em H2O (3 min) - Incubação em solução de prata (5 mL de nitrato de prata 10x: 10,2 g de nitrato de prata em 500 mL de H2O; 75L de Formaldeído 37% e 50 mL de H2O qsp) (10 min) - 2 lavagens em H2O - Adição de solução reveladora (1,5 g de Carbonato de Sódio; 75 L de Formaldeído 37%; 20 L de Tiossulfato de Sódio: 50 g de tiossulfato em 2 mL de H2O qsp) Resultados Preliminares:  Resultados Preliminares Até o momento fez-se a PCR de 32 amostras de pacientes para o polimorfismo do 5HTTLPR. Destas, 25 amplificaram, com os seguintes genótipos: 01- Homozigoto longo 05- Heterozigoto 06- Homozigoto longo 08- Homozigoto longo 09- Homozigoto longo 10- Homozigoto curto 11- Homozigoto longo 12- Homozigoto curto 14- Homozigoto curto 15- Homozigoto curto 16- Homozigoto curto 17- Homozigoto curto 18- Heterozigoto 19- Homozigoto longo 20- Homozigoto longo 21- Homozigoto longo 22- Homozigoto curto 23- Homozigoto curto 24- Homozigoto curto 25- Homozigoto curto 26- Homozigoto curto 27- Homozigoto curto 28- Homozigoto curto Resultados preliminares:  Resultados preliminares 31- Homozigoto curto 32- Homozigoto curto Agradecimentos:  Agradecimentos Laboratório de Farmacologia e Biologia Molecular do ICB, principalmente à profa. Wolfanga Prof. e orientador Humberto Correa Coordenação do PAD - Cleida Slide21:  Obrigada a todos

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