Evaluation steps

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Published on November 2, 2008

Author: aSGuest2360

Source: authorstream.com

Slide 1: CITOGENÉTICA HUMANA Y GENÉTICA TOXICOLÓGICA CIGETOX Depto de Bioquímica Clínica- INFIBIOC FFyB. UBA Prof. Dra. Marta Ana Carballo Dra. Marcela López Nigro- Bioq. Victoria Arroyo Lic. y Ms. Susana Bartolotta- Dra. Marta Scuteri- Becarios Doctorado: Bioq. Catalina Cortada; Bioq. Fernanda Simoniello Becarios Iniciación: Med. Gabriel Angeleri- Lic. Erika Portmann Becario Estudiante: Natalia Casanova Tesistas de Licenciatura: Estud. Silvana Curieses- Estud. Natalia Balarino Slide 2: INDICADORES O MARCADORES BIOLOGICOS REPRESENTAN CAMBIOS EN EL ORGANISMO O EN LA CELULA QUE PUEDEN SER MEDIDOS EN DIFERENTES SISTEMAS BIOLOGICOS PERMITIENDO DETECTAR EVENTOS RELACIONADOS CON SU FISIOLOGIA DE MANERA CUALI O CUANTITATIVA Podemos decir en forma general que los biomarcadores son utilizados para: : Podemos decir en forma general que los biomarcadores son utilizados para: detectar una exposición determinar las consecuencias biológicas de la exposición detectar los estados iniciales e intermedios de un proceso patológico identificar a los individuos sensibles de una población fundamentar la decisión de intervenir, tanto a nivel individual como ambiental Es útil identificar una serie de marcadores específicos: de exposición, de susceptibilidad y de efecto. Marcadores internos de dosis, marcadores de dosis biológicamente efectivos, marcadores de respuesta biológica y marcadores de enfermedades. Slide 4: MARCADOR DE EXPOSICION SEÑALA LA PRESENCIA DE UNA SUSTANCIA EXOGENA O SUS METABOLITOS EN UN ORGANISMO. UN XENOBIOTICO EN FLUIDOS O TEJIDOS ES UNA SEÑAL DE QUE EL ORGANISMO TUVO CONTACTO CON ESTE, ES DECIR, HA ESTADO EXPUESTO A EL Slide 5: MARCADOR DE SUSCEPTIBILIDAD ES UN INDICADOR DE UNA LIMITACION ADQUIRIDA O INHERENTE DE UN ORGANISMO EN RESPUESTA A LA EXPOSICION A UN AGENTE TOXICO. SON INDICADORES DE UN INCREMENTO DEL RIESGO EN CUALQUIER ETAPA DEL PROCESO PATOLOGICO Slide 6: MARCADOR DE EFECTO ES UN INDICADOR DE ALTERACION BIOQUIMICA, FISIOLOGICA, GENETICA O DE OTRO TIPO DEPENDIENDO DE SU MAGNITUD, PUEDEN SER RECONOCIDAS COMO UN DAÑO O COMO UNA PATOLOGIA POTENCIAL O EFECTIVO SOBRE LA SALUD. SE CONSTITUYEN EN SEÑALES DE ADVERTENCIA TEMPRANA BIOMARCADORES-EVALUACION DE RIESGO : BIOMARCADORES-EVALUACION DE RIESGO Slide 8: Exposición Carga corporal total Excreción Tejido no blanco Dosis en tejido blanco Dosis biológicamente efectiva Cambios biológicos iniciales Lesiones preclínicas Lesiones clínicas Aductos macromoleculares no efectivos Células u organelas no blanco Repair excreción Repair Respuesta fisiológica Repair Estudios toxicocinéticos Estudios mecanísticos Medicina clínica Marcadores biológicos de exposición Marcadores biológicos de efecto EVALUACION NIVELES DE COMPLEJIDAD CRECIENTE : EVALUACION NIVELES DE COMPLEJIDAD CRECIENTE PRIMARIO (Bacteriano, Viral) (I) SECUNDARIO (Cultivo de células) (II) TERCIARIO (Organismo entero) (III) CUATERNARIO (Epidemiológico) (IV) Slide 10: Niveles de Evaluación PRIMER NIVEL (I) SEGUNDO NIVEL (II) CUARTO NIVEL (IV) TERCER NIVEL (III) Nivel Molecular o bacteriano Ensayos en procariotes o eucariotes inferiores Ejemplo: Test de Ames Nivel “In vitro” Ensayos en cultivos de células eucariotas Ejemplo: Líneas celulares CHO, V79, Hela , Linfocitos de Sangre Periférica Nivel “In vivo” Ensayos organismo entero Ejemplos: Plantas, animales (invertebrados o vertebrados) y humanos expuestos Nivel Epidemiológico Ensayos en poblaciones expuestas Ejemplo: exposición accidental, terapéutica o laboral de individuos expuestos NIVEL PRIMARIO : NIVEL PRIMARIO Slide 12:  Screening Bajo costo Resultados en corto tiempo Poco equipamiento Mutaciones y Retromutaciones No disyunción y recombinación Slide 13: Desarrollo de cepas de S.typhimurium auxótrofas para histidina que permiten evaluar la retromutación de este organismo a histidina (+ ). Es decir que una especie que ha perdido una característica, vuelve a adquirirla en base a otra mutación. TA100, TA98, TA1535, TA1537, TA102, TA104 rfa, ∆uvr B, plásmido pKM101, plásmido pAQ1 Se utiliza para agentes que modifiquen los procesos de recombinación Se basa en que las mutantes deficientes en reparación son más sensibles que las cepas salvajes a la acción de diversos agentes físicos y químicos. Los ensayos se realizan comparando las frecuencias de reversión de las cepas parentales con aquella que lleva la mutación. Test de Ames Rec Assay NIVEL SECUNDARIO : NIVEL SECUNDARIO Slide 15: Equipamiento Alto Costo Mayor tiempo Ensayos específicos Micro y Macromutaciones Slide 16: S9-MIX Fracción microsomal Hepática Aroclor 1254 (500mg/kg i.p.-5días) ß- naftoflavona (80 mg/kg) + Fenobarbital sódico (50mg /kg) Cc DE Proteínas: 40 mg/l Esterilidad S9 MIX

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