Deshidratación - Plastinación

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Health & Medicine

Published on February 17, 2014

Author: LuisAcevedo1

Source: slideshare.net

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Presentacón sobre el proceso de plastinación de componentes anatómicos - Etapa deshidratación

Deshidratación   Plas%nación   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   1  

Principios  de  Deshidratación   En   plas%nación   como   en   histología   la   deshidratación   es   el   proceso   de   reemplazar   el   agua   del   espécimen   por   un   solvente   orgánico   miscible  en  agua.       Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   2  

Punto  clave   •  Es   importante   diferenciar   claramente   los   agentes   deshidratantes   de   los   solventes   intermediarios  o  Vola%le  Intermedium.     •  En  teoría  primero  se  deshidrata  y  luego  se   hace  un  paso  por  solvente  intermediario   (generalmente  Cloruro  de  Me%leno)  pero  si  el   agente  deshidratante  %ene  las  caracterís%cas   de  un  solvente  intermediario  este  paso  se   puede  obviar.   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   3  

Agentes  deshidratantes   Su  estructura  química  puede  variar:   –  Mono-­‐hídricos   •  Metanol,  etanol  e  isopropanol     –  Di-­‐hídricos   •  Monoe%len  glicol   •  Die%len  glicol   –  Tri-­‐hídricos   •  Glicerina   –  Cetonas   •  Acetona     Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   4  

Vola%le  Intermedium   •  Cualquier  solvente  orgánico  con  presión  de   vapor  alta  y  y  bajo  punto  de  ebullición  (+35ºC   -­‐  60  ºC).   •  Puede  ser  miscible  en  agua  (Ej.  Acetona)   •  Puede  ser  no  miscible  en  agua  (Ej.  Cloruro  de   me%leno)             Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   5  

Difusión   •  El  proceso  de  deshidratación  se  dá  por  el   mecanismo  de  Difusión  simple   •  Del  la%n  diffundere  =  expandir  o  dispersar.   •  Es  la  mezcla  gradual  de  diferentes   sustancias  sin  usar  fuerzas  externas.   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   6  

Deshidratación  en  el  concepto  de   Plas<nación   Para   producir   un   plas%nado   agua   y   lípidos   son   reemplazados  por  un  polímero  curable.   1.  Deshidratación:   Agua   y   parte   de   los   lípidos   son   reemplazados   por   un   solvente   orgánico   miscible   en   agua.   2.  El   liquido   deshidratante   es   intercambiado   por   un   Vola%le   intermedium.   Si   un   Vola%le   intermedium   como   acetona   es   usado   para   deshidratación   el   paso   2   se   obvia.   3.  Impregnación   Forzada:   El   Vola%le   Intermedium     en   el   espécimen  es  reemplazado  por  el  polímero  curable.       Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   7  

Procedimiento  básico     Deshidratación   ascendente   (procedimiento   mas   conocido).   •  Consiste  en  poner  el  componente  anatómico  en  baños   de   deshidrataciones   seriales   con   concentraciones   ascendentes,   el   primer   baño   con   deshidratante   al   50%-­‐70%  y  el  úl%mo  con  deshidratante  al  100%.   Frezze  Subs%tu%on   •  Hielo   del   espécimen   es   reemplazado   por   el   agente   deshidratante  a  -­‐24ºC.   •  El   agente   usado   es   acetona   y   desde   el   primer   baño   se   usa  al  100%   En   ambos   procedimientos   terminan   cuando   el   contenido   de  agua  en  el  componentes  es  inferior  al  1%   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   8  

Procedimiento  básico     •  El  reemplazo  del  agua  y  lípidos  del  tejido  se  da   por  difusión.   •  Entre  más  contenido  acuoso  tenga  el  tejido   mas    demorará    la  deshidratación.   •  El  contenido  de  agua  de  la  solución  de   deshidratación  se  determina  por  su  densidad.     Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   9  

Notas  Importantes   •  La  relación  entre  el  peso  del  componente  y  el   volumen  de  deshidratante  debe  ser  10:1   •  Un   componente   fresco   o   fijado   no   puede   simplemente   ser   sumergido   en   el   líquido   deshidratante   ,   ya   que   este   se   encogerá   (shrinkage).   •  No   poner   el   componente   anatómico   en   acetona   o   etanol   al   100%   a   temperatura   ambiente  para  no  causar  retracción  extrema.   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   10  

Desengrasado     Durante  la  deshidratación  los  componentes  también  se   da  el  proceso  de  desengrasado.       Este  proceso  depende  de:     1.  Tipo  de  deshidratante:  Cloruro  de  Me%leno  más  fuerte   que  acetona.   2.  Temperatura:  Acetona  a  +25ºC  mucho  mas  fuerte  que   a  -­‐25ºC   3.  Relación  entre  el  volumen  del  tejido  adiposo  y  el   volumen  del  baño  de  deshidratación.   4.  Duración  de  la  deshidratación.   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   11  

Cronograma  de  trabajo    (Freeze  subs<tu<on)   1. Lavar  especímenes  y  enfriar  a  +1ºC  -­‐  +5ºC.   2. Pre-­‐enfriar  Acetona  a  -­‐25ºC   3. Sumergir  componente  anatómico  en  acetona   4. Cambiar  acetona.   Por  razones  de  seguridad  se  deben  hacer  los   cambios  de  acetona  a  -­‐25ºC   –  Estar  debajo  del  punto  de  inflamación  (-­‐19ºC)   –  Presión  de  vapor  a  esta  Tº  es  muy  baja.   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   12  

Cronograma  de  trabajo     (Freeze  subs<tu<on)   Casos  especiales:   •  C e r e b r o :   M a n t e n e r   d e s h i d r a t a c i ó n   p o r   encima   del   98%   para   disminuir  retracción   •  I n t e s < n o s :   P a r a   mantener   flexibilidad   se   recomienda   que   estos   permanezcan   lo   menos   posible  en  acetona  .   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   13  

Duración  de  la     Deshidratación   •  Usualmente  acetona  es  cambiada  3  veces  si  la   razón  es  10:1.   •  Cerebro  Humano:  Toma  2  semanas  en  el   primer  baño  ,  1  semana  en  el  segundo  y  4  días   en  el  tercero.   •  Riñones  y  ar<culaciones:  3  –  4  semanas   •  Cabezas  e  hígados:  5-­‐6  semanas   •  Intes<nos:  5  a  10  días.     Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   14  

Protocolo  Universidad     de  Murcia,  España   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   15  

Protocolo  Universidad    de  Murcia,  España   Luis  Miguel  Acevedo.  Facultad  de  Medicina   UdeA-­‐  lmacevedoa@medicina.udea.edu.co   16  

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